Digital radiography as an alternative method in the evaluation of bone density in uremic rats / Radiografia digital como método alternativo na avaliação da densidade óssea em ratos urêmicos

ABSTRACT Introduction: Digital radiography (DRx) may provide a suitable alternative to investigate mineral and bone disorder (MBD) and loss of bone density (BD) in rodent models of chronic kidney disease (CKD). The objective of this study was to use DRx to evaluate BD in CKD rats, and to evaluate the correlation between DRx findings and serum MBD markers and bone histomorphometry. Methods: Uremia was induced by feeding Wistar rats an adenine-enriched diet (0.75% for 4 weeks/0.10% for 3 weeks); outcomes were compared to a control group at experimental weeks 3, 4, and 7. The following biochemical markers were measured: creatinine clearance (CrC), phosphate (P), calcium (Ca), fractional excretion of P (FeP), alkaline phosphatase (ALP), fibroblast growth factor-23 (FGF-23), and parathyroid hormone (PTH). DRx imaging was performed and histomorphometry analysis was conducted using the left femur. Results: As expected, at week 7, uremic rats presented with reduced CrC and higher levels of P, FeP, and ALP compared to controls. DRx confirmed the lower BD in uremic animals (0.57±0.07 vs. 0.68 ± 0.06 a.u.; p = 0.016) compared to controls at the end of week 7, when MBD was more prominent. A severe form of high-turnover bone disease accompanied these biochemical changes. BD measured on DRx correlated to P (r=-0.81; p = 0.002), ALP (r = -0.69, p = 0.01), PTH (r = -0.83, p = 0.01), OS/BS (r = -0.70; p = 0.02), and ObS/BS (r = -0.70; p = 0.02). Conclusion: BD quantified by DRx was associated with the typical complications of MBD in CKD and showed to be viable in the evaluation of bone alterations in CKD.

RESUMO Introdução: A radiografia digital (RxD) pode representar uma alternativa adequada para investigar o distúrbio mineral e ósseo (DMO) e a perda de densidade óssea (DO) em modelos de roedores da doença renal crônica (DRC). O objetivo deste estudo foi utilizar a RxD para avaliar a DO em ratos com DRC, e avaliar a correlação entre os achados da RxD e marcadores séricos de DMO e histomorfometria óssea. Métodos: A uremia foi induzida pela alimentação de ratos Wistar com dieta enriquecida com adenina (0,75% por 4 semanas/0,10% por 3 semanas); os resultados foram comparados com um grupo controle nas semanas experimentais 3, 4 e 7. Os seguintes marcadores bioquímicos foram medidos: clearance de creatinina (CCr), fosfato (P), cálcio (Ca), fração excretada de P (FeP), fosfatase alcalina (ALP), fator de crescimento de fibroblastos-23 (FGF-23) e paratormônio (PTH). A imagem da RxD foi obtida e a análise histomorfométrica foi realizada com o fêmur esquerdo. Resultados: como esperado, na semana 7, os ratos urêmicos apresentaram redução do CCr e níveis mais altos de P, FeP e ALP em comparação aos controles. A RxD confirmou a menor DO em animais urêmicos (0,57 ± 0,07 vs. 0,68 ± 0,06 u.a.; p = 0,016) em comparação aos controles no final da semana 7, quando a DMO foi mais proeminente. Uma forma grave de doença óssea de alta renovação celular acompanhou essas mudanças bioquímicas. A DO, medida na RxD foi correlacionada a P (r = -0,81; p = 0,002), ALP (r = -0,69, p = 0,01), PTH (r = -0,83, p = 0,01), OS/BS (r = -0,70 p = 0,02) e Ob.S/BS (r = -0,70; p = 0,02). Conclusão: A DO quantificada por RxD esteve associada às complicações típicas da DMO na DRC e mostrou-se viável na avaliação de alterações ósseas na DRC.

Efeito do fotossensibilizador butyl azul de toluidina na terapia fotodinâmica antimicrobiana para o tratamento da periodontite experimental em ratos / Effects of butyl toluidine blue photosensitizer on antimicrobial photodynamic therapy for experimental periodontitis treatment in rats

O presente estudo avaliou pela primeira vez "in vivo" os efeitos de três concentrações do butyl azul de toluidina (BuTB) como agente fotossensibilizador na terapia fotodinâmica antimicrobiana (aPDT), como terapia coadjuvante a raspagem e alisamento radicular (RAR), para o tratamento de periodontite experimental (PE) em ratos. A PE foi induzida por meio da instalação de um fio de algodão ao redor do primeiro molar inferior esquerdo. Posteriormente os animais foram aleatoriamente distribuídos em 7 grupos com 15 animais cada, através de uma tabela gerada por computador, de acordo com os seguintes tratamentos: RAR (n=15) - RAR seguido de irrigação local de solução salina fisiológica; BuTB-0,1 (n=15) - RAR seguido de aplicação local de BuTB na concentração de 0,1 mg/mL; aPDT-0,1 (n=15) - RAR seguido da aplicação local de BuTB na concentração de 0,1 mg/mL e irradiação com laser de diodo (LD) de InGaAlP (660 nm, 40 mW, 60 s, 2,4 J); BuTB-0,5 (n=15) ­ RAR seguido de aplicação local de BuTB na concentração de 0,5 mg/mL; aPDT-0,5 (n=15) ­ RAR seguido da aplicação local de BuTB na concentração de 0,5 mg/mL e irradiação com LD; BuTB-2,0 (n=15) - RAR seguido de aplicação local de BuTB na concentração de 2 mg/mL; aPDT-2,0 (n=15) - RAR seguido da aplicação local de BuTB na concentração de 2 mg/mL e irradiação com LD. Decorridos 7, 15 e 30 dias pós-tratamento, 5 animais de cada grupo foram submetidos à eutanásia. A área de furca dos molares foi submetida às análises histológica, histométrica e dos padrões de imunomarcação para TGF-ß1, OCN e TRAP. Os dados foram submetidos à análise estatística (α = 5%). De acordo com a análise histométrica na região de furca, todos os grupos experimentais apresentaram menor perda óssea comparado ao grupo controle. Histologicamente, os espécimes do aPDT-0,5 apresentaram uma resposta inflamatória local mais branda e menos extensa, com melhor reestruturação tecidual em todos os períodos. Aos 30 dias observou-se resolução total da resposta inflamatória local, com presença de tecido conjuntivo denso. Alguns espécimes apresentavam trabéculas ósseas com contorno regular revestido com osteoblastos ativos, incluindo áreas de neoformação óssea. O tratamento com aPDT na concentração de 0,5 mg/mL resultou em padrões mais altos de imunomarcação de TGF-ß1 em todos os períodos e de OCN aos 30 dias. Diante dos resultados obtidos, todas as concentrações do novo fotossensibilizador BuTB trouxeram resultados adicionais ao tratamento da PE em relação a RAR. No entanto, a aPDT realizada com a concentração de 0,5 mg/mL resultou em benefícios adicionais na resposta inflamatória local e melhor reestruturação tecidual(AU)

The present study evaluated for the first time the effects of three concentrations of butyl toluidine blue (BuTB) as a photosensitizing agent on antimicrobial photodynamic therapy (aPDT), as adjuvant therapy to scaling and root planing (SRP), for the treatment of experimental periodontitis (EP) in rats. EP was induced by placing a cotton thread around the lower left first molar. Subsequently, the animals were randomly distributed into seven groups with 15 animals each, through a computer generated table, according to the following treatments: SRP (n = 15), SRP followed by local irrigation of physiological saline solution; BuTB-0.1 (n = 15), SRP followed by local application of 0.1 mg/mL BuTB; aPDT-0.1 (n = 15), SRP followed by local application of BuTB at 0.1 mg/mL concentration and irradiation with InGaAlP diode laser (DL) (660 nm, 40 mW, 60 s, 4 J); BuTB-0.5 (n = 15), SRP followed by local application of BuTB at 0.5 mg/mL concentration; aPDT-0.5 (n = 15), SRP followed by local application of BuTB at 0.5 mg/mL concentration and DL irradiation; BuTB-2.0 (n = 15), SRP followed by local application of BuTB at 2 mg/mL concentration; aPDT-2.0 (n = 15), SRP followed by local application of BuTB at 2 mg/mL concentration and DL irradiation. The animals (n=5) from each group were submitted to euthanasia at 7, 15 and 30 days post-treatment. The furcation area of the first lower molar was submitted to histological, histometric and immunohistochemical analyses to identify TGF-ß1, OCN and TRAP. The data were submitted to statistical analysis (α = 5%). According to the histometric analysis in the furcation region, all experimental groups presented lower bone loss compared to the control group. Histologically, the aPDT -0.5 specimens presented a milder and less extensive local inflammatory response, with better tissue remodeling in all periods. Total resolution of the local inflammatory response was observed at 30 days with presence of mature connective tissue. Some specimens presented bone trabeculae with a regular contour and active osteoblasts, including areas of bone neoformation. Treatment with aPDT-0.5 also resulted in higher immunolabelling patterns of TGFß1 at all periods and of OCN at 30 days. All concentrations of the new photosensitizer BuTB resulted in significant improvement for EP treatment in relation to SRP. However, aPDT combined with BuTB at 0.5 mg / mL showed the best benefits for inflammatory response and periodontal repair process(AU)

Inflammatory lung injury in rabbits: effects of high-frequency oscillatory ventilation in the prone position / Lesão inflamatória pulmonar em coelhos: efeitos da ventilação oscilatória de alta frequência em posição prona

ABSTRACT Objective: To compare the effects that prone and supine positioning during high-frequency oscillatory ventilation (HFOV) have on oxygenation and lung inflammation, histological injury, and oxidative stress in a rabbit model of acute lung injury (ALI). Methods: Thirty male Norfolk white rabbits were induced to ALI by tracheal saline lavage (30 mL/kg, 38°C). The injury was induced during conventional mechanical ventilation, and ALI was considered confirmed when a PaO2/FiO2 ratio < 100 mmHg was reached. Rabbits were randomly divided into two groups: HFOV in the supine position (SP group, n = 15); and HFOV with prone positioning (PP group, n = 15). For HFOV, the mean airway pressure was initially set at 16 cmH2O. At 30, 60, and 90 min after the start of the HFOV protocol, the mean airway pressure was reduced to 14, 12, and 10 cmH2O, respectively. At 120 min, the animals were returned to or remained in the supine position for an extra 30 min. We evaluated oxygenation indices and histological lung injury scores, as well as TNF-α levels in BAL fluid and lung tissue. Results: After ALI induction, all of the animals showed significant hypoxemia, decreased respiratory system compliance, decreased oxygenation, and increased mean airway pressure in comparison with the baseline values. There were no statistically significant differences between the two groups, at any of the time points evaluated, in terms of the PaO2 or oxygenation index. However, TNF-α levels in BAL fluid were significantly lower in the PP group than in the SP group, as were histological lung injury scores. Conclusions: Prone positioning appears to attenuate inflammatory and histological lung injury during HFOV in rabbits with ALI.

RESUMO Objetivo: Comparar os efeitos das posições prona e supina durante ventilação oscilatória de alta frequência (VOAF) sobre oxigenação e inflamação pulmonar, lesão histológica e estresse oxidativo em um modelo de lesão pulmonar aguda (LPA) em coelhos. Métodos: Trinta coelhos Norfolk machos brancos foram submetidos à LPA por meio de lavagem traqueal com salina (30 ml/kg, 38°C). A lesão foi induzida durante a ventilação mecânica convencional, e a LPA foi considerada confirmada na presença de relação PaO2/FiO2 < 100 mmHg. Os coelhos foram aleatoriamente divididos em dois grupos: VOAF em posição supina (grupo PS, n = 15); e VOAF em posição prona (grupo PP, n = 15). Para a VOAF, a pressão média das vias aéreas foi inicialmente estabelecida em 16 cmH2O. No 30º, 60º e 90º min após o início do protocolo de VOAF, a pressão média das vias aéreas foi reduzida para 14, 12 e 10 cmH2O, respectivamente. No 120º min, os animais foram recolocados ou permaneceram na posição supina por mais 30 min. Foram avaliados os índices de oxigenação e escores histológicos de lesão pulmonar, bem como os níveis de TNF-α em lavado broncoalveolar e tecido pulmonar. Resultados: Após a indução da LPA, todos os animais apresentaram hipoxemia significativa, diminuição da complacência do sistema respiratório, diminuição da oxigenação e aumento da pressão média das vias aéreas em comparação aos valores basais. Não houve diferenças estatisticamente significativas entre os dois grupos, em nenhum dos momentos avaliados, quanto a PaO2 e índice de oxigenação. Entretanto, os níveis de TNF-α no lavado broncoalveolar foram significativamente menores no grupo PP que no grupo PS, assim como os escores histológicos de lesão pulmonar. Conclusões: A posição prona parece atenuar a lesão pulmonar inflamatória e histológica durante a VOAF em coelhos com LPA.

Anti-inflammatory effect of lycopene on endotoxin-induced uveitis in rats / Efeito anti-inflamatório do licopeno na uveíte induzida por endotoxina em ratos

ABSTRACT Purpose: We evaluated the efficacy of lycopene, a dietary carotenoid and potent antioxidant, against ocular inflammation and oxidative stress in an experimental uveitis model. Methods: Endotoxin-induced uveitis (EIU) was induced in Sprague-Dawley rats by a single subcutaneous injection of 200 μg lipopolysaccharide (LPS). Induction of EIU was preceded by daily intraperitoneal injection of 10 mg/kg lycopene for three consecutive days (Lycopene + LPS group) or equivolume vehicle (Vehicle + LPS group). A positive control group received 1 mg/kg dexamethasone pretreatment (DEX + LPS), and a negative control group received daily vehicle injection but no LPS (Vehicle Control). Twenty-four hours after LPS or final vehicle administration, eyes were enucleated, and aqueous humor was collected for measurement of the number of infiltrating cells, total protein concentration, and levels of nitric oxide (NO), tumor necrosis factor-α (TNF-α), interleukin-6 (IL-6), and oxidative stress markers. Inflammatory response severity was compared among groups clinically and histopathologically. Results: Infiltrating cell number, total protein concentration, and NO, TNF-α, and IL-6 levels were significantly elevated in the aqueous humor of Vehicle + LPS group rats compared to Vehicle Controls. Compared to the Vehicle + LPS group, lycopene pretreatment significantly reduced aqueous humor concentrations of oxidative stress markers, NO (0.29 ± 0.1 μM vs. 0.19 ± 0.1 μM, p=0.003), TNF-α (71.0 ± 22.3 ng/ml vs. 50.1 ± 2.1 ng/ml, p=0.043), and IL-6 (121.6 ± 3.0 pg/ml vs. 111.1 ± 5.6 pg/ml, p=0.008). Inflammatory score was also reduced (2.0 ± 0.0 vs. 0.4 ± 0.5, p=0.001). Lycopene reduced the infiltrating cell count and protein concentration, but differences did not reach significance. Most lycopene effects were equivalent to dexamethasone. Conclusions: Lycopene may aid in the clinical management of uveitis by suppressing inflammation and oxidative stress.

RESUMO Objetivo: Avaliamos o efeito do licopeno, um carotenóide dietético e um potente anti-oxidante, sobre a inflamação ocular e estresse oxidativo em modelo de uveíte experimental. Métodos: Uveíte foi induzida por endotoxina (EIU) em ratos Sprague-Dawley por uma única injeção subcutânea de 200 ug de lipopolissacárido (LPS). A indução de EIU foi precedida por injeção intraperitoneal de licopeno em uma dose de 10 mg/kg (grupo LPS + Licopeno) ou veículo de mesmo volume (grupo LPS + Veículo), durante 3 dias consecutivos. O grupo controle positivo recebeu uma dose de 1 mg/kg de Dexametasona (grupo DEX + LPS) e o grupo controle negativo recebeu doses diárias de veículo mas sem LPS (grupo Controle Veículo). Vinte e quatro horas após a administração do LPS, os olhos foram enucleados, humor aquoso foi recolhido, e o número de células infiltrativas, a concentração de proteína, assim como os níveis de óxido nítrico (NO), fator de necrose tumoral α (TNF-α), interleucina-6 e marcadores de estresse oxidativo foram determinados no humor aquoso. Além disso, a resposta inflamatória foi avaliada clinicamente e histologicamente. Resultados: As células infiltrativas, concentração de proteína, o NO, TNF-α, interleucina-6 foram significativamente elevados no humor aquoso de ratos do grupo Grupo LPS + Veículo quando comparados ao Grupo Controle Veículo. O tratamento com licopeno diminuiu significativamente estes aumentos. Comparado ao Grupo LPS + Veículo, o licopeno reduziu significativamente as concentrações no humor aquoso dos marcadores de estresse oxidativo e NO (de 0,29 ± 0,1 μM para 0,19 ± 0,1 μM, p=0,003), o TNF-α (de 71,0 ± 22,3 ng/ml para 50,1 ± 2,1 ng/ml, p=0,043), interleucina-6 (de 121,6 ± 3,0 pg/ml para 111,1 ± 5,6 pg/ml, p=0,008). Do mesmo modo, o aumento do número de células infiltrativas no tecido uveal em seções histológicas foi significativamente inibido pelo licopeno, a pontuação inflamatória diminuiu de 2,0 ± 0,0 para 0,4 ± 0,5, p=0,001. Embora, não tenha sido estatisticamente significativo, o licopeno reduziu a contagem de células infiltrativas e a concentração de proteínas no humor aquoso. Conclusões: Estes resultados sugerem que o licopeno pode ter efeitos benéficos no tratamento da inflamação ocular, através dos seus efeitos anti-inflamatórios e antioxidantes.

Reposição de vitamina B12 reduz comportamento depressivo induzido em ratos jovens / Vitamin B12 replacement therapy reduces induced depressive behavior in young rats

OBJETIVOS: Avaliar, em modelo animal, se a depleção suave de vitamina B12, anterior ao desenvolvimento de anemia, induz à depressão; e se a suplementação com vitamina B12 em animais jovens pode atuar como medida preventiva da depressão. MÉTODOS: Foram utilizados ratos Wistar divididos em grupo controle (n=11) e grupo B12 (n=10). O grupo B12 recebeu suplementação de vitamina B12 na água de beber, ao longo de todo o estudo. Na fase 1, os animais dos dois grupos receberam por seis semanas dieta adicionada de pectina (50g/kg da ração), para induzir à depleção de vitamina B12. Após esse período, foi aplicado o Teste de Porsolt para indução e avaliação do estado depressivo. Foi realizado também um hemograma para pesquisa de anemia. Na fase 2 (com duração de quatro semanas), a pectina foi removida da ração e os mesmos testes foram aplicados novamente no final do período. RESULTADOS: Durante as duas fases do estudo o número de hemácias, o hematócrito e a concentração de hemoglobina mantiveram-se normais, ou seja, os ratos não desenvolveram anemia. Os resultados do Teste de Nado Forçado ao final da fase 1 mostram que, em relação ao grupo controle, o grupo suplementado apresentou tempo de desistência menor (0,44±0,32 vs. 0,75±0,18 minutos, p=0,024) e tempo de natação maior (4,64±0,27 vs. 4,32±0,28 minutos, p=0,013), indicando redução do estado depressivo com a reposição de vitamina B12. Na comparação entre grupos no final da fase 2 não houve diferença significativa em nenhum dos componentes do Teste de Nado Forçado. CONCLUSÕES: A depleção suave de vitamina B12 na dieta, em nível não indutor de anemia, favoreceu o estado depressivo em ratos jovens, enquanto a sua suplementação na situação de depleção reverteu esse quadro. Em condições de nutrição adequada, entretanto, a suplementação dessa vitamina não exerceu efeito sobre o estado depressivo. Estes resultados estimulam a realização de mais estudos que aprofundem a avaliação das relações entre vitamina B12 e depressão em jovens. Além disso, este estudo também abre perspectivas para um novo modelo experimental de depressão, induzida por depleção de vitamina B12.

AIMS: To assess whether mild vitamin B12 deficiency induces depression prior to the development of anemia, and whether vitamin B12 supplementation can act as a preventive measure against depression in young rats. METHODS: Wistar rats were divided into control group (n=11) and B12 group (n=10). The B12 group received vitamin B12 supplementation in drinking water throughout the study. In Phase 1, all animals received a pectin-supplemented diet (50g/kg) for six weeks to induce vitamin B12 depletion. After that, the Porsolt test was applied for induction and evaluation of depressive state and blood was collected for a complete blood count. In Phase 2, which lasted two weeks, pectin was removed from the diet and the same tests were applied again at the end. RESULTS: In both phases, erythrocyte count, hematocrit level, and hemoglobin concentration were normal, i.e., the rats did not develop anemia. The forced swim test results at the end of Phase 1 show that the B12 group exhibited shorter immobility time than the control group (0.44±0.32 vs. 0.75±0.18 minutes, p=0.024) and longer swimming time (4.64±0.27 vs. 4.32±0.28 minutes, p=0.013), indicating reduction of depressive state with vitamin B12 replacement therapy. When the groups were compared at the end of Phase 2, there was no significant difference in any of the forced swim test components. CONCLUSIONS: Mild vitamin B12 deficiency, at a level that did not induce anemia, led to depressive state in young rats where vitamin B12 supplementation reversed the effects of vitamin depletion. Under normal nutritional circumstances, however, vitamin B12 supplementation did not have any effect on depressive state. These findings encourage further studies to investigate the associations between vitamin B12 and depression in young individuals. Moreover, this study also presents perspectives for a new experimental model of depression induced by vitamin B12 depletion.

Caso de hemianopsia reversível no pós-parto decorrente de síndrome da encefalopatia reversível posterior (PRES) em gestante com eclâmpsia tardia / Reversible hemianopsia in postpartum due to posterior reversible encephalopathy syndrome in pregnant with late eclampsia

Resumo Objetivos: Descrever um caso de Síndrome da Encefalopatia Reversível Posterior em gestante diagnosticada com eclâmpsia tardia, bem como seu manejo clínico. Descrição do caso: Paciente feminina, 34 anos, em sua terceira gestação, iniciou com aumento dos níveis tensionais durante o trabalho de parto e, após onze dias de puerpério, apresentou quadro de diminuição da acuidade visual à direita, seguida de crise convulsiva e subsequente perda parcial da visão do olho direito. Após a realização de exames de imagem e descartada a possibilidade de acidente vascular encefálico, a paciente foi diagnosticada com Síndrome da Encefalopatia Reversível Posterior (PRES). Instituído o manejo clínico das crises convulsivas e hipertensivas, houve remissão completa dos sintomas e reversão do quadro clínico inicial. Conclusões: Uma vez adequadamente diagnosticada e tratada, a Síndrome da Encefalopatia Reversível Posterior pode apresentar evolução satisfatória, especialmente quando associada a um fator desencadeado agudamente, como a eclâmpsia.

Abstract Objectives: To describe a case of Posterior Reversible Encephalopathy Syndrome diagnosed in pregnant women with late-eclampsia, as well as its clinical management. Case description: A 34 years old patient in her third pregnancy had started with high blood pressure levels during labor; after eleven days postpartum, she presented a decreased right visual acuity; subsequently one episode of seizure followed by partial loss of vision in the right eye. After conducting tests and ruled out stroke, the patient was diagnosed as Posterior Reversible Encephalopathy Syndrome (PRES). Established the clinical management of seizures and hypertensive crisis, there was complete remission of symptoms and reversal of the initial clinical picture. Conclusion: Once properly diagnosed and treated, the Posterior Reversible Encephalopathy Syndrome can present satisfactory progress, especially when associated with an acutely triggered factor, as eclampsia.

Quercetin protects the retina by reducing apoptosis due to ischemia-reperfusion injury in a rat model / Quercetina protege a retina reduzindo a apoptose consequente à lesão por isquemia e reperfusão em um modelo de rato

Purpose: This study aimed to investigate the effect of quercetin on apoptotic cell death induced by ischemia-reperfusion (I/R) injury in the rat retina. Methods: Twenty-four rats were divided into four equal groups: control, ischemic, solvent, and quercetin. I/R injury was achieved by elevating the intraocular pressure above the perfusion pressure. Intraperitoneal injections of 20 mg/kg of quercetin and dimethyl sulfoxide (DMSO) were performed in the quercetin and solvent groups, respectively, immediately prior to I/R injury, and the researchers allowed for the retinas to be reperfused. Forty-eight hours after injury, the thicknesses of the retinal ganglion cell layer (RGCL), inner nuclear layer (INL), inner plexiform layer (IPL), outer plexiform layer (OPL), and outer nuclear layer (ONL) were measured in all groups. Moreover, the numbers of terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick-end-labeled [TUNEL (+)] cells and caspase-3 (+) cells in both INL and ONL were evaluated in all groups. Results: The administration of quercetin was found to reduce the thinning of all retinal layers. The mean thickness of INL in the quercetin and ischemic groups was 21 ± 5.6 µm and 16 ± 6.4 µm, respectively (P<0.05). Similarly, the mean thickness of ONL in the quercetin and ischemic groups was 50 ± 12.8 µm and 40 ± 8.7 µm, respectively (P<0.05). The antiapoptotic effect of quercetin in terms of reducing the numbers of both TUNEL (+) cells and caspase-3 (+) cells was significant in INL. The mean number of TUNEL (+) cells in INL in the ischemic and quercetin groups was 476.8 ± 45.6/mm2 and 238.72 ± 251/mm2, respectively (P<0.005). The mean number of caspase-3 (+) cells in INL of ischemic and quercetin groups was 633.6 ± 38.7/mm2 and 342.4 ± 36.1/mm2, respectively (P<0.001). Conclusion: The use of quercetin may be beneficial in the treatment of retinal I/R injury because of its antiapoptotic effect on the retinal layers, particularly in INL. .

Objetivo: O objetivo deste estudo é investigar o efeito da quercetina, contra a morte celular por apoptose induzida por lesão consequente à isquemia-reperfusão (I/R) na retina de ratos. Método: Vinte e quatro ratos foram divididos em quatro grupos iguais: controle, isquêmico, solvente e quercetina. O modelo lesão por I/R foi realizado por meio da elevação da pressão intraocular acima da pressão de perfusão, em todos os grupos. Injecções intraperitoneais de 20 mg/kg de quercetina ou sulfóxido de dimetilo (DMSO) foram realizadas nos grupos quercetina e solvente, respectivamente, imediatamente antes da lesão por I/R, permitindo que as retinas fossem reperfundidas. Quarenta e oito horas após a lesão, as espessuras de camada de células ganglionares da retina (RGCL), camada nuclear interna (INL), camada plexiforme interna (IPL), camada plexiforme externa (OPL), e a camada nuclear externa (ONL) foram medidas em todos os grupos. Além disso, o número de células TUNEL (+) e caspase-3 (+) tanto na camada nuclear interna quanto na camada nuclear externa foi avaliada em todos os grupos. Resultados: A administração de quercetina diminuiu o afinamento de todas as camadas da retina em comparação com o grupo isquêmico. A espessura média da camada nuclear interna nos grupos quercetina e isquêmico foi de 21 ± 5,6 µm e 16 ± 6,4 µm, respectivamente (p<0,05). A espessura média da camada nuclear externa no grupo quercetina e isquêmico foi 50 ± 12,8 µm e 40 ± 8,7 µm, respectivamente (p<0,05). O efeito anti-apoptótico de quercetina em termos de redução do número de células TUNEL (+) e caspase-3 (+) foi significativa na INL. O número médio de células TUNEL (+) da camada nuclear interna no grupo isquêmico e quercetina foi 476,8 ± 45,6/mm2 e 238,72 ± 251/mm2, respectivamente (p<0,005). O médio número de células de caspase-3 (+) na INL do grupo isquêmico e quercetina foi 633,6 ± 38,7/mm2 e 342,4 ± 36,1/mm2, respectivamente (p<0,001). Conclusão: A utilização ...

Chronic intermittent hypoxia increases encoding pigment epithelium-derived factor gene expression, although not that of the protein itself, in the temporal cortex of rats, / Hipóxia intermitente crônica aumenta a expressão gênica, mas não proteica, de pigment epithelium-derived factor no córtex temporal de ratos

Objective: Obstructive sleep apnea syndrome is mainly characterized by intermittent hypoxia (IH) during sleep, being associated with several complications. Exposure to IH is the most widely used animal model of sleep apnea, short-term IH exposure resulting in cognitive and neuronal impairment. Pigment epithelium-derived factor (PEDF) is a hypoxia-sensitive factor acting as a neurotrophic, neuroprotective, and antiangiogenic agent. Our study analyzed performance on learning and cognitive tasks, as well as PEDF gene expression and PEDF protein expression in specific brain structures, in rats exposed to long-term IH. Methods: Male Wistar rats were exposed to IH (oxygen concentrations of 21-5%) for 6 weeks-the chronic IH (CIH) group-or normoxia for 6 weeks-the control group. After CIH exposure, a group of rats were allowed to recover under normoxic conditions for 2 weeks (the CIH+N group). All rats underwent the Morris water maze test for learning and memory, PEDF gene expression and PEDF protein expression in the hippocampus, frontal cortex, and temporal cortex being subsequently assessed. Results: The CIH and CIH+N groups showed increased PEDF gene expression in the temporal cortex, PEDF protein expression remaining unaltered. PEDF gene expression and PEDF protein expression remained unaltered in the frontal cortex and hippocampus. Long-term exposure to IH did not affect cognitive function. Conclusions: Long-term exposure to IH selectively increases PEDF gene expression at the transcriptional level, although only in the temporal cortex. This increase is probably a protective mechanism against IH-induced injury. .

Objetivo: A síndrome da apneia obstrutiva do sono caracteriza-se principalmente por episódios de hipóxia intermitente (HI) durante o sono e associa-se a diversas complicações. A exposição à HI é o mais usado modelo animal de apneia do sono, e protocolos de curta duração causam diversos prejuízos cognitivos e neuronais. Pigment epithelium-derived factor (PEDF, fator derivado do epitélio pigmentado) é um fator neurotrófico, neuroprotetor e antiangiogênico sensível à hipóxia celular. Nosso estudo analisou o desempenho em tarefas cognitivas e de aprendizagem, bem como a expressão do gene PEDF e da proteína PEDF em estruturas cerebrais específicas em ratos expostos a HI de longa duração. Métodos: Ratos Wistar foram expostos a HI (21-5% de oxigênio) durante 6 semanas - o grupo HI crônica (HIC) - ou a normóxia durante 6 semanas - o grupo controle. Após a exposição à HIC, um grupo de ratos foi exposto a normóxia durante 2 semanas (o grupo HIC+N). Todos os animais foram submetidos ao labirinto aquático de Morris para avaliação de memória e aprendizado; avaliou-se também a expressão do gene PEDF e da proteína PEDF no hipocampo e nos córtices frontal e temporal. Resultados: Os grupos HIC e HIC+N apresentaram um aumento de expressão do gene PEDF no córtex temporal, porém sem aumento dos níveis proteicos. A expressão do gene PEDF e da proteína PEDF manteve-se inalterada nas demais estruturas. A exposição de longa duração à HI não afetou a função cognitiva. Conclusões: A exposição de longa duração à HI aumenta seletivamente a expressão do gene PEDF ao nível transcricional, embora apenas no córtex temporal. Esse aumento é provavelmente um mecanismo de proteção contra a HI. .

Comparison of the effects of subconjunctival and topical anti-VEGF therapy (bevacizumab) on experimental corneal neovascularization / Comparação do efeito da terapia anti-VEGF (bevacizumab) subconjuntival e tópica na neovascularização corneana experimental

Purpose: To compare the effects of bevacizumab applied either subconjunctivally or topically, in a rat model of corneal neovascularization induced by alkali burn. Methods: The right corneas of 24 Wistar-Albino rats were cauterized with silver nitrate sticks. The rats were divided randomly and equally into three groups: no treatment control (n=8), subconjunctival bevacizumab treatment (n=8), and topical bevacizumab treatment (n=8). Immediately following cauterization, the subconjunctival group was treated with a 0.05 ml (1.25 mg) bevacizumab subconjunctival injection. The topical group was treated with 10 mg/ml bevacizumab twice daily, and the control group received subconjunctival saline injections twice daily. The burn stimulus and neovascularization scores were evaluated using a technique previously described by Mahoney and Waterbury. Digital photographs were obtained before the eyes were enucleated and corneal sections were then analyzed by histopathology. Results: The mean burn stimulus score was 1.86 ± 0.6 and there was no statistical difference between the groups (p=0.730). The mean neovascularization scores in the subconjunctival and topical bevacizumab groups were statistically lower than the control group (p<0.05). The mean percentage area of corneal neovascularization was 82.5 ± 22.1 in the control group, 42.7 ± 15.0 in the subconjunctival group, and 55.8 ± 18.2 in the topical group. The differences between the control and treatment groups were statistically significant (p<0.05). Histopathology showed that the treatment groups presented less neovascularization, inflammation, and fibroblast activity than the control group (p<0.05). Conclusions: This study demonstrates that both subconjunctival and topical administrations of bevacizumab inhibit corneal neovascularization and decrease inflammation and fibroblast activity in a rat model of corneal neovascularization induced by alkali burn. .

Objetivo: Comparar o efeito de bevacizumab aplicado subconjuntival e topicamente em um modelo de neovascularização de córnea de ratos induzida por queimadura alcalina. Métodos: Córneas direitas de 24 ratos Wistar-Albino foram cauterizados por nitrato de prata. Os indivíduos foram divididos aleatoriamente e igualmente em três grupos: controle (n=8), o bevacizumab subconjuntival (n=8), o bevacizumab tópico (n=8). Imediatamente após a cauterização, 0,05 ml (1,25 mg) de bevacizumab foi injetado no grupo subconjuntival. Grupo tópico foi inculcado com 10 mg/ml de bevacizumab duas vezes por dia. O grupo controle recebeu solução salina normal, topicamente, duas vezes ao dia. A graduação do estímulo da queimadura e a graduação da neovascularização foram avaliados utilizando a técnica descrita por Mahoney e Waterbury. Fotografias digitais foram obtidas dos olhos serem enucleados. Seções da córnea foram analisadas por histopatologia. Resultados: A média da graduação do estímulo da queimadura foi de 1,86 ± 0,6 e não houve diferença estatisticamente entre os grupos (p=0,730). As médias das graduações da neovascularização no grupo bevacizumab subconjuntival e no grupo bevacizumab tópico foram estatisticamente menores do que o grupo controle (p<0,05). A percentagem média de área de neovascularização da córnea foi de 82,5 ± 22,1 no grupo controle, 42,7 ± 15,0 no grupo subconjuntival e 55,8 ± 18,2 no grupo tópico. As diferenças entre os grupos de tratamento e grupo de controlo foram estatisticamente significativos (p<0,05). A histopatologia mostrou que os grupos de tratamento apresentavam menos neovascularização, inflamação e atividade de fibroblastos do que o grupo controle (p<0,05). ...

A new experimental model of cigarette smoke-induced emphysema in Wistar rats / Um novo modelo experimental murino de enfisema: enfisema induzido pela fumaça do cigarro em ratos Wistar

OBJECTIVE: To describe a new murine model of cigarette smoke-induced emphysema. METHODS: Twenty-four male Wistar rats were divided into two groups: the cigarette smoke group, comprising 12 rats exposed to smoke from 12 commercial filter cigarettes three times a day (a total of 36 cigarettes per day) every day for 30 weeks; and the control group, comprising 12 rats exposed to room air three times a day every day for 30 weeks. Lung function was assessed by mechanical ventilation, and emphysema was morphometrically assessed by measurement of the mean linear intercept (Lm). RESULTS: The mean weight gain was significantly (approximately ten times) lower in the cigarette smoke group than in the control group. The Lm was 25.0% higher in the cigarette smoke group. There was a trend toward worsening of lung function parameters in the cigarette smoke group. CONCLUSIONS: The new murine model of cigarette smoke-induced emphysema and the methodology employed in the present study are effective and reproducible, representing a promising and economically viable option for use in studies investigating the pathophysiology of and therapeutic approaches to COPD. .

OBJETIVO: Descrever um novo modelo murino de enfisema induzido pela fumaça de cigarro. MÉTODOS: Vinte e quatro ratos Wistar foram divididos em dois grupos: o grupo fumaça de cigarro, com 12 ratos expostos à fumaça de 12 cigarros comerciais com filtro três vezes ao dia (um total de 36 cigarros por dia), sete dias por semana, durante 30 semanas e o grupo controle, com 12 animais expostos ao ar ambiente três vezes ao dia, sete dias por semana, durante 30 semanas. A função pulmonar foi avaliada por meio de ventilação mecânica, e o enfisema foi morfometricamente avaliado por meio do diâmetro alveolar médio (Lm). RESULTADOS: A média de ganho de peso foi significativamente menor (aproximadamente dez vezes menor) no grupo fumaça de cigarro do que no grupo controle. O Lm foi 25.0% maior no grupo fumaça de cigarro. Os parâmetros de função pulmonar tenderam a ser piores no grupo fumaça de cigarro. CONCLUSÕES: O novo modelo murino de enfisema induzido pela fumaça de cigarro e a metodologia empregada neste estudo são eficazes e reproduzíveis; são, portanto, uma opção promissora e economicamente viável para estudos sobre a fisiopatologia e o tratamento da DPOC. .

Lung and liver hhanges due to the induction of cirrhosis in two experimental models / Alteracoes hepaticas e pulmonares decorrentes da inducao de cirrose em dois modelos experimentais.

Context To evaluate lung and liver changes in two experimental models using intraperitoneal carbon tetrachloride (CCl4) and bile duct ligation (BDL). Methods Twenty-four male Wistar rats were divided into a control group (CO) and an experimental group (EX). We evaluated the liver transaminases (AST, ALT, AP), arterial blood gases (PaO2, PCO2 and SpO2) and lipid peroxidation by TBARS (substances that react to thiobarbituric acid) and chemiluminescence. We also evaluated the antioxidant enzyme superoxide dismutase (SOD) and histology of lung tissue and liver. Results There were significant differences in AST, ALT, ALP and PaO2 between CO group and EX group (P<0.05). The levels of TBARS, chemiluminescence and activity of enzyme superoxide dismutase were increased to different degrees in the CCl4 groups: CO and in the BDL -EX (P<0.05, respectively). In the lung histology, an increase in the wall thickness of the pulmonary artery and a diameter reduction in the CCl4 animal model were observed: comparing CO group with EX group, we observed a reduction in thickness and an increase in the diameter of the artery wall lung. Conclusion Both experimental models have caused liver damage and alterations in the artery wall that are associated with major changes in pulmonary gas exchange. .

Objetivo Avaliar as alterações pulmonares e hepáticas em dois modelos experimentais de cirrose hepática pelo uso de tetracloreto de carbono intraperitoneal (CCl4) e ligadura de ducto biliar. Métodos Vinte e quatro ratos machos Wistar foram divididos em grupo controle (CO) e experimental (EX). Foram avaliadas as transaminases hepáticas (AST, ALT, FA), gasometria arterial (PaO2, PCO2 e SatO2) e a lipoperoxidação através de TBARS (substâncias que reagem ao ácido tiobarbitúrico) e por quimiluminescência. Também foi avaliada a atividade antioxidante da enzima superóxido dismutase e a histologia do tecido pulmonar e hepático. Resultados Nas enzimas hepáticas (AST, ALT e FA), bem como na PaO2 foram observadas diferenças significativas (P≤0,05) entre os grupos CO vs EX em ambos modelos. Os níveis de TBARS, quimiluminescência e a atividade da enzima superóxido dismutase encontram-se aumentados nos grupos CCl4 e ligadura de ducto biliar: CO vs EX (P≤0,05). Na análise histológica do pulmão observamos um aumento na espessura da parede da artéria pulmonar e uma redução no diâmetro no modelo CCl4: CO vs EX, e no modelo de ligadura de ducto biliar podemos observar uma redução da espessura e aumento no diâmetro da parede da artéria pulmonar. Conclusão Ambos os modelos experimentais provocaram dano hepático, além de causar alterações na parede da artéria pulmonar contribuindo na redução das trocas gasosas. .

Progressão microestrutural e molecular da lesão pulmonar em um modelo de Síndrome do Desconforto Respiratório Agudo / Microstructural and molecular progression of the pulmonary injury in a model of Acute Respiratory Distress Syndrome (ARDS)

Introdução: O padrão de distribuição da lesão pulmonar na síndrome do desconforto respiratório agudo (SDRA) tem sido alvo de interesse de estudos com tomografia computadorizada. Entretanto, pouca informação é disponível quanto a distribuição e progressão histológica da lesão pulmonar na SDRA. Objetivos: Caracterizar a distribuição e progressão histológica da lesão pulmonar em modelo experimental de SDRA em suínos pela quantificação de parâmetros estruturais, inflamatórios e de remodelamento da matriz extracelular (MEC) e correlacioná-los com variáveis funcionais e de tomografia de impedância elétrica (TIE). Métodos: Vinte e três porcas da raça Landrace foram divididos em três grupos: 1) Sham (n=5): animais submetidos ao preparo e monitorização; 2) Lesão (n=9): animais submetidos ao protocolo de lesão e eutanasiados após 3 horas; 3) Lesão+MV: animais submetidos ao protocolo de lesão e eutanasiados após 40 horas de ventilação mecânica (VM) segundo a "estratégia ARDSnet". Os parâmetros histológicos foram mensurados por análise de imagem e incluíam: área alveolar, índice de espessamento septal, densidade neutrofílica, membrana hialina, hemorragia, edema intraalveolar e proporção de fibras colágenas. As medidas de cada parâmetro foram normalizadas pela mediana do grupo Sham. Expressão gênica de proteínas da MEC (colágeno tipo I e tipo III, versican, biglican e decorin) foram quantificados por PCR em tempo real. A ventilação regional foi mensurada por TIE. Foram analisadas regiões anteriores e posteriores do pulmão para cada variável. Resultados: A densidade neutrofílica foi menor no grupo Lesão+VM (p=0,02). A análise da área alveolar no grupo Lesão+VM mostrou que as regiões posteriores apresentaram menor área que as regiões anteriores (p=0,012). Entretanto, o espessamento septal foi maior no grupo Lesão+VM, especialmente nas regiões anteriores, quando comparado ao grupo Lesão (p <= 0,01)...

Introduction: The pattern of lesion distribution in acute respiratory distress syndrome (ARDS) has been addressed in computed tomography studies. However, there is little information concerning the progression and distribution of histological lung injury in ARDS. Objectives: To characterize the histological progression and distribution of lung injury in a pig ARDS model by the quantification of structural, inflammatory and extracellular matrix (ECM) remodeling parameters and to correlate them with functional and electrical impedance tomography (EIT) variables . Methods: Twenty-three healthy female Landrace pigs were divided into three groups: 1) Sham (n=5): animals subjected to preparation and monitoring; 2) Injury (n=9): animals subjected to the injury protocol and euthanized after 3 hours. 3) Injury+MV (n=9): animals subjected to the injury protocol and euthanized after 40 hours of ARDSnet mechanical ventilation. Histological parameters measured by image analysis included: alveolar area, septal thickening index, neutrophils density, hyaline membrane, hemorrhage, alveolar edema and collagen fibers content. The parameters values were normalized by Sham group median values. Gene expression of ECM proteins (collagen type I and type III, versican, biglycan and decorin) was quantified by Real Time-PCR. Regional ventilation was measured by EIT. For each variable the anterior and posterior regions of the lung were analyzed. Results: Density neutrophil was lesser in the Injury+MV group (p=0.02). Alveolar area in the posterior regions of the Injury+MV group was lesser than the anterior regions (p=0.012). However, the septal thickening was higher in Injury+MV group, especially in the anterior regions, when compared to the Injury group (p <= 0.01)...

Modulação da pressão intracraniana em um modelo experimental de hipertensão abdominal e lesão pulmonar aguda / Factors associated with variation in intracranial pressure in a model of intra-abdominal hypertension with acute lung injury

OBJETIVO: Avaliar o efeito de alterações hemodinâmicas, respiratórias e metabólicas sobre a pressão intracraniana em um modelo de lesão pulmonar aguda e síndrome compartimental abdominal. MÉTODOS: Oito porcos Agroceres foram submetidos, após a instrumentação, a cinco cenários clínicos: 1) estado basal com baixa pressão intra-abdominal e pulmão sadio; 2) pneumoperitôneo, com pressão intra-abdominal de 20 mm Hg; 3) lesão pulmonar aguda induzida por lavagem pulmonar e desativação de surfactante; 4) pneumoperitôneo com pressão intra-abdominal de 20 mm Hg na vigência de lesão pulmonar aguda e com PEEP baixo; e 5) PEEP ajustado a 27 cm H2O na vigência de pneumoperitôneo e lesão pulmonar aguda. Variáveis respiratórias e hemodinâmicas foram coletadas. Análise multivariada foi realizada buscando as variáveis associadas com elevação da pressão intracraniana nos cinco cenários estudados. RESULTADOS: Após a análise multivariada, nas situações não associadas com lesão pulmonar aguda apenas a pressão de platô das vias aéreas se correlacionou positivamente com a pressão intracraniana. Nos modelos associados com lesão pulmonar aguda, a pressão de platô de vias aéreas, a pressão arterial de CO2, o CO2 no final da expiração e a pressão venosa central se correlacionaram positivamente com incrementos da pressão intracraniana. CONCLUSÃO: Em um modelo de disfunção orgânica múltipla com situações clínicas associadas com aumento da pressão torácica e abdominal, o incremento da pressão intracraniana desencadeado pela elevação da pressão abdominal parece ser decorrente da piora da complacência do sistema respiratório e da redução do gradiente para drenagem venosa cerebral ocasionado pela elevação da pressão venosa central.

OBJECTIVE: To evaluate the effects of hemodynamic, respiratory and metabolic changes on intracranial pressure in a model of acute lung injury and abdominal compartment syndrome. METHODS: Eight Agroceres pigs were submitted to five different clinical scenarios after instrumentation: 1) a baseline condition with low intra-abdominal pressure and healthy lungs; 2) pneumoperitoneum with 20 mmHg intra-abdominal pressure; 3) acute lung injury induced by pulmonary lavage with surfactant deactivation; 4) pneumoperitoneum with 20 mmHg intra-abdominal pressure with lung pulmonary injury and low positive end-expiratory pressure; and 5) 27 cmH2O positive end-expiratory pressure with pneumoperitoneum and acute lung injury. Respiratory and hemodynamic variables were collected. A multivariate analysis was conducted to search for variables associated with increased intracranial pressure in the five scenarios. RESULTS: Only plateau airway pressure showed a positive correlation with intracranial pressure in the multivariate analysis. In the models with acute lung injury, plateau airway pressure, CO2 arterial pressure, end tidal CO2 and central venous pressure were positively correlated with increased intracranial pressure. CONCLUSION: In a model of multiple organ dysfunction with associated clinical conditions causing increased intra-thoracic and abdominal pressure, increased intracranial pressure triggered by elevated intra-abdominal pressure is apparently caused by worsened respiratory system compliance and a reduced brain venous drainage gradient due to increased central venous pressure.

A new experimental model for inducing interstitial cystitis by oxidative stress using intravesical instillation of a nitric oxide donor gel / Novo modelo experimental de indução de cistite intersticial por estresse oxidativo utilizando instilação intravesical de gel doador de óxido nítrico

Objective: The aim of this study was to develop an experimental model of inducing interstitial cystitis through intravesical instillation of a polymeric solution containing the NO donor S-nitrousglutathione (GSNO) and to compare it to the experimental interstitial cystitis induced by vesical instillation of protamine and potassium chloride. Methods: A total of 40 female Wistar rats were used and divided into four groups: 1 - ten rats treated with saline solution + GSNO; 2 - ten rats treated with saline solution + polymeric solution (without GNSO); 3 - ten rats treated with protamine sulphate + KCl; 4 - ten rats treated with protamine sulphate + GSNO. The rats received one application (five animals in each group) or three applications (five animals in each group) of the corresponding substance through intravesical instillation, and after six days (five animals in each group) or nine days (five animals in each group) they were euthanized and their bladders were removed for macroscopic evaluation and histological study. Results: In the macroscopic evaluation edema and hyperemia of the mucosa were observed in 2 (22%) animals in Group 1, in no (0%) animal in Group 2, in 10 (100%) animals in Group 3, and in 5 (50%) animals in Group 4. In the protamine + KCl group and in saline + GSNO, similar effects were observed in the bladder wall. The animals in Group 2 (saline + polymeric solution) showed significantly less vascular congestion compared to the other groups after 9 days of the instillation (p = 0.0035). Significant fibrosis was observed in Groups 3 and 4, 6 days (p = 0.3781) and 9 days (p = 0.0459) after instillations, when compared to controls (Group 2). All groups presented neutrophilic infiltrate of variable intensity, 6 days after instillations (p = 0.7277). After 9 days, there was a regression of the infiltrate, with no evidence of accentuated neutrophilic reaction in all the groups (p = 0.2301). Conclusions: The inflammatory response to bladder instillation with an aqueous solution of S-nitrousglutathione was very similar to that induced by bladder instillation of protamine and KCl. Instillation of an aqueous solution of S-nitrousglutathione can be considered a new model for experimental induction of interstitial cystitis.

Objetivo: O objetivo deste estudo foi o desenvolvimento de um modelo experimental para a indução de cistite intersticial, por meio da instilação vesical de uma solução polimérica de gel doador de óxido nítrico S-nitrosoglutationa (GSNO), e compará-lo ao modelo experimental para a indução da cistite intersticial por instilação vesical de protamina e cloreto de potássio. Métodos: Foram utilizadas 40 ratas Wistar, divididas em quatro grupos: 1 - dez ratas tratadas com solução salina + GSNO; 2 - dez ratas tratadas com solução salina + solução de polímeros (sem GNSO); 3 - dez ratas tratadas com sulfato de protamina + KCl; 4 - dez ratas tratadas com sulfato de protamina + GSNO. As ratas receberam uma aplicação (cinco animais em cada grupo) ou três aplicações (cinco animais em cada grupo) da substância correspondente através de instilação vesical, e após seis dias (cinco animais em cada grupo) ou nove dias (cinco animais em cada grupo) foram sacrificadas, e a bexiga foi removida para exame macroscópico e estudo histológico. Resultados: Na avaliação macroscópica observou-se edema e hiperemia da mucosa em 2 animais (22%) do Grupo 1, em nenhum animal (0%) do Grupo 2, em 10 animais (100%) do Grupo 3, e em 5 animais (50%) do Grupo 4. No grupo protamina + KCl e no grupo solução salina + GSNO, observamos efeitos semelhantes sobre a parede da bexiga. Os animais do Grupo 2 (salina + polímeros) apresentaram significantemente menos congestão vascular que os dos outros grupos após 9 dias de instilação (p = 0,0035). Observou-se fibrose significante nos Grupos 3 e 4, 6 dias (p = 0,3781) e 9 dias (p = 0,0459) após as instilações, quando comparados com o grupo controle (Grupo 2). Todos os grupos apresentaram infiltrados neutrofílicos de intensidade variável, 6 dias após as instilações (p = 0,7277). Após 9 dias, observou-se regressão do infiltrado, sem evidência de acentuada reação neutrofílica em todos os grupos (p = 0,2301). Conclusão: A resposta inflamatória à instilação da bexiga com uma solução aquosa de S-nitroglutationa foi muito semelhante àquela induzida pela instilação de protamina e KCl. A instilação de uma solução aquosa de S-nitroglutationa pode ser considerada um novo modelo experimental para a indução da cistite intersticial.

Modelo experimental para restrição do crescimento fetal em ratos: efeito sobre o glicogênio hepático e morfometria intestinal e renal / Experimental rat model for fetal growth restriction: effects on liver glycogen and intestinal and renal morphometry

OBJETIVO: avaliar a eficácia do modelo de RCIU por ligadura da artéria uterina simulando insuficiência placentária em ratos. MÉTODOS: fetos de ratas prenhes Sprague-Dawley foram divididos em três grupos: RCIU (restrição de crescimento intrauterino), com fetos submetidos à ligadura da artéria uterina com 18,5 dias de gestação (termo = 22 dias), C-RCIU (controle da restrição), com fetos do corno contralateral à ligadura, CE (Controle Externo), com fetos de ratas sem manipulação. Com 21,5 dias de gestação, foi realizada cesárea, os fetos foram pesados e dissecados para análise morfométrica e histológica do fígado, intestino e rins. RESULTADOS: os dados morfométricos avaliados mostraram o peso corpóreo (PC), hepático (PH) e intestinal (PI) dos fetos com RCIU menor que C-RCIU e CE (p<0,001). O peso placentário (PP), renal (PR) e as relações PH/PC, PI/PC e PR/PC não se alteraram. A espessura renal foi menor nos fetos com RCIU (p<0,001) e houve diminuição da camada mucosa e submucosa intestinal (p<0,05). A avaliação histológica mostrou diminuição do glicogênio hepático nos fetos com RCIU em relação aos grupos C-RCIU e CE. CONCLUSÕES: o modelo descrito foi eficiente e causou RCIU fetal simétrica com diminuição da maioria dos órgãos, especialmente do peso hepático, e alteração nos depósitos de glicogênio.

PURPOSE: to evaluate the effectiveness of the IUGR model by uterine artery ligation mimicking placental insufficiency in rats. METHODS: sprague-Dawley rat fetuses were divided into three groups: IUGR (intrauterine growth restriction), with fetuses in the right horn of pregnant rats subjected to right uterine artery ligation at 18.5 days of gestation (term = 22 days); C-IUGR (control of restriction), with control fetuses in the left horn, and EC (external control), with fetuses of intact rats. Animals were harvested by cesarean section at day 21.5 days of gestation. Fetuses were weighed and then sacrificed. The intestine, liver, kidney and placenta were weighed and dissected for morphometric and histological analysis. RESULTS: the morphometric data showed decreased body weight (BW), liver weight (LW) and intestinal weight (IW) of fetuses with IUGR compared to C-IUGR and EC (p<0.001). The placental weight (PW), renal weight (RW) and LW/BW, IW/BW, and RW/BW ratios did not change. IUGR fetuses had decreased kidney thickness (p<0.001) and decreased thickness of the intestinal mucosa and submucosa (p<0.05). Histological evaluation showed reduction of liver glycogen storage in fetuses with IUGR compared to C-IUGR and CE. CONCLUSIONS: the model described was efficient and caused symmetric fetal IUGR with decreased size of most organs, especially the liver, and changes in glycogen stores.

Autoimmune uveitis: study of treatment therapies / Uveíte autoimune: estudo de terapias para tratamento

Experimental autoimmune uveitis is an organ-specific T-cell mediated autoimmune disease characterized by inflammation and consequent destruction of the neural retina and adjacent tissues. Inflammation in experimental autoimmune uveitis may be induced in rodents by immunization with retinal antigens, such as interphotoreceptor retinoid-binding protein. We present a review of experimental studies that correlate primary immunobiological functions with this chronic disease and the possible use of molecules for the treatment of autoimmune uveitis.

A uveíte autoimune experimental é uma doença autoimune mediada por células T, órgão-específica e caracterizada por inflamação e subsequente destruição da retina neural e tecidos adjacentes. A inflamação na uveíte autoimune experimental pode ser induzida em roedores pela imunização com antígenos retinianos, tais como a proteína interfotorreceptora ligante de retinoide. Apresentamos aqui uma revisão de estudos experimentais que correlacionam as principais funções imunobiológicas com esta doença crônica e o possível uso de moléculas para o tratamento da uveíte autoimune.

Modification of the gasless fetoscopy technique for the treatment of large myelomeningocele: a study in sheep / Modificação da técnica de fetoscopia de suspensão para tratamento fetal de grandes meningomieloceles: estudo em ovelhas

Objective: To change the gasless fetoscopy technique in order to reduce the diameter of entry orifices in the myometrium. Methods: Seven pregnant ewes were submitted to fetoscopy for repairing a large skin defect measuring 4.0 x 3.0 cm, created in the fetal lumbar region at the gestational age of 100 days. The defect was repaired through continuous suture of the skin with approximation of borders. Gasless fetoscopy was used for performing the suture with three orifices to allow entry of the trocar into the myometrium. A 5.0-mm optical trocar, and 3.5-mm grasping, dissecting and suturing forceps were used. After surgery, pregnancy was maintained until the animals were euthanized on the 133rd day of gestation, and the fetuses were evaluated. Results: Seven pregnant ewes underwent surgery; the first two cases were characterized as the Pilot Group, in which the endoscopic technique was modified and caliber reduction was possible in two out of three entry orifices in the myometrium. In the five remaining cases (Study Group), the repair was successfully carried out in all the fetuses, and the mean duration of fetoscopy was 98 minutes. There was a case of maternal death attributed to intrauterine infection. Mean intrauterine permanence after surgery was 12 days. Conclusions: The technique was successfully modified, allowing reduction of the uterine orifices necessary to perform the repair of a skin defect in the fetal lumbar region through a new fetoscopy technique. The impact of this modification in repair of myelomeningocele in human fetuses should be studied.

Objetivo: Modificar a técnica de fetoscopia de suspensão para redução do calibre dos orifícios de entrada no miométrio. Métodos: Sete ovelhas grávidas foram submetidas à fetoscopia para correção de um grande defeito de pele medindo 4,0 x 3,0 cm, criado na região lombar fetal com 100 dias de gestação. O defeito era corrigido através de sutura contínua da pele, aproximando-se as suas bordas. Para realizar a sutura, foi realizada a fetoscopia de suspensão, utilizando-se três orifícios para entrada de trocarte no miométrio. O trocarte da ótica era de 5,0 mm e das pinças de apreensão, dissecção e sutura eram de 3,5 mm. Após a cirurgia, a gestação era mantida até o sacrifício, realizado no 133º dia de gestação, quando os fetos eram avaliados. Resultados: Sete ovelhas prenhes foram operadas. Os dois primeiros casos constituíram o Grupo Piloto, no qual a técnica endoscópica foi modificada e a redução do calibre foi possível em dois dos três orifícios de entrada no miométrio. Nos cinco demais casos (Grupo de Estudo) a correção foi realizada com sucesso em todos os fetos e o tempo médio de duração da fetoscopia foi de 98 minutos. Houve um caso de morte materna atribuído à infecção intrauterina. A média de permanência intraútero após a cirurgia foi de 12 dias. Conclusões: A técnica foi modificada com sucesso, permitindo a redução do calibre dos orifícios uterinos necessários para realizar a correção de um defeito de pele na região lombar do feto através de uma nova técnica de fetoscopia. O impacto desta modificação na correção da meningomielocele em fetos humanos deve ser estudado.

Characterization of pseudarthrosis with ultrasound backscattered signals in rats / Caracterização da pseudoartrose com sinais de retroespalhamentos de ultrassom em ratos

PURPOSE: To propose a novel model of pseudarthrosis in a small animal and to investigate the ability of backscatter parameters from ultrasound signals in differentiating normal bone from those ones with pseudarthorsis. METHODS: Twelve Rattus norvegicus albinus free from pathogenic species (SPF) were randomly divided in two groups, with six animals each. In the Control group a surgical approach to the femur was made, followed by the synthesis of the muscle and skin layers. The Experimental group was submitted to an osteotomy of the femur and a vascularized flap of the fascia lata was interposed in the line of the fractured bone. Then the alignment and bone stabilization were accomplished, by using nylon stitch in U shape introduced in holes made in the proximal and distal fractured bone. Bone samples were scanned with ultrasound and signals were collected for each one to analyze the parameter Apparent Integrated Backscatter - AIB. RESULTS: Radiological and anatomopathologic studies revealed the absence of bone consolidation with persistence of fiber-osteoid tissue. Values of the ultrasound parameter AIB from normal bones were statistically different from those with pseudarthrosis. CONCLUSION: The experimental model was suitable for pseudarthrosis development in rats and the ultrasound backscatter parameters were able to identify such a bone disease in vitro.

OBJETIVO: Propor um novo modelo de pseudoartrose em animais de pequeno porte e investigar o potencial de parâmetros de retroespalhamento de ultrassônico em diferenciar osso normal e com pseudoartrose. MÉTODOS: Doze Rattus norvegicus albinus (SPF) foram distribuídos aleatoriamente em dois grupos, tendo cada grupo seis animais. No grupo Controle realizou-se uma abordagem cirúrgica ao fêmur, seguida da síntese por planos do músculo e da pele. O grupo Experimental foi submetido à osteotomia do fêmur aduzida da confecção de um retalho pediculado de fascia lata para interposição entre os segmentos resultantes da fratura induzida cirurgicamente. Prosseguiu-se com o alinhamento e estabilização óssea, mediante a confecção de um nó com fio de náilon em formato de U, introduzido em orifícios efetuados nas extremidades proximal e distal à fratura. As amostras ósseas foram irradiadas pelo ultrassom e sinais foram coletados para cada uma no intuito de analisar o parâmetro Retroespalhamento Integrado Aparente - AIB. RESULTADOS: Estudos radiológicos e anatomopatológicos evidenciaram a ausência de consolidação óssea com persistência de tecido fibro-osteóide. Os valores de AIB para ossos normais foram estatisticamente diferentes em relação aos ossos com pseudoartrose. CONCLUSÃO: O modelo experimental apresentou-se adequado para a formação de pseudoartrose em ratos e o parâmetro de retroespalhamento de ultrassom foi capaz de detectar tal doença óssea, in vitro.

Clinical evaluation and induced corneal vascularization study by native and anionic collagen membranes in rabbits corneas / Avaliação clínica e estudo da vascularização corneal induzida pelas membranas de colágeno nativo e aniônico em córneas de coelhos

PURPOSE: To evaluate the corneal vascularization (CV) and the clinical aspects induced by interlamellar graft with native (NCM) and anionic (ACM) collagen membranes in rabbits corneas. METHODS: An interlamellar graft with a 0.25 x 0.25 cm NCM (group 1) or ACM (group 2) fragment was performed in the right eye (treated eye). In the left eye, an estromal tunnel was done (control eye). Sixteen rabbits were used, and they were subdivided into two experimental groups of eight animals each. The clinical evaluation was performed at the 1st, 3rd, 7th, 15th and 30th postoperative days. Corneal vascularization analysis was performed after 30 days by the Images Analizator System Leica Qwin-550®. RESULTS: After 7 days, corneal vascularization was observed at about 2.25 ± 0.71 mm (NCM) and at about 1.0 ± 1.69 mm (ACM), respectively, from the limbus in direction to the central cornea. After 15 days, CV increased in both groups (5.25 ± 1.03 mm - NCM; 2.0 ± 2.39 mm - ACM) and then progressively decreased until day 30 (2.25 ± 2.10 mm - NCM; 0.75 ± 2.12 mm - ACM). The statistical analysis indicated that the averages of the distances from the limb vessels to the grafts observed after 7 and 15 days had not differed statistically (p=0.17), and after 15 and 30 postoperative days had a tendency to differ statistically (p=0.09). The control eyes did not present any changes. CONCLUSION: The interlamellar graft with native and anionic collagen membranes induced corneal vascularization when applied to rabbit corneas, but anionic collagen membrane induced a smaller corneal vascularization when compared to native collagen membrane. Although further studies are required, the results found in this study demonstrated the usefulness of interlamellar graft with native and anionic collagen membranes in keratoplasties. These membranes consists in one more graft option for the surgical treatment of corneal repair in rabbits and others animals, when other forms of medical...

OBJETIVO: Avaliar os aspectos clínicos e vascularização corneal (VC) induzida pelo enxerto interlamelar das membranas de colágeno nativo (MCN) e de colágeno aniônico (MCA) em córneas de coelhos. MÉTODOS: Um fragmento com 0,25 x 0,25 cm de MCN (grupo 1) e MCA (grupo 2) foi realizado no olho direito (olho tratado) por enxertia interlamelar. No olho esquerdo (olho controle) foi realizado apenas um túnel estromal. No olho direito (olho controle) foi realizado apenas um túnel estromal. Dezesseis coelhos foram utilizados e foram divididos em dois grupos experimentais composto por oito animais cada. A avaliação clínica foi realizada aos 1, 3, 7, 15 e 30 dias de pós-operatório. A análise da vascularização corneal foi realizada após 30 dias pelo Sistema de analisador de imagens Leica Qwin-550®. RESULTADOS: Após 7 dias, a vascularização corneal do limbo em direção central da córnea observada foi de 2,25 ± 0,71 mm (MCN) e 1,0 ± 1,69 mm (ACM), respectivamente. Após 15 dias a vascularização corneal aumentou em ambos os grupos (5,25 ± 1,03 mm - MCN; 2,0 ± 2,39 mm - MCA), diminuindo até o 30º dia (2,25 ± 2,10 mm - MCN; 0,75 ± 2,12 mm - MCA). A análise estatística indicou que as médias das distâncias dos vasos do limbo em direção ao enxerto observadas após 7 e 15 dias não diferiram estatisticamente (p=0,17), e 15 e 30 dias de pós-operatório houve tendência a diferir estatisticamente (p=0,09). Os olhos controles não apresentaram nenhuma alteração. CONCLUSÃO: As membranas de colágeno nativo e de colágeno aniônico induzem a vascularização corneal quando aplicadas na córnea de coelhos por meio de enxertia interlamelar, mas membrana de colágeno ativo induz a pequena vascularização corneal quando comparada à membrana de colágeno aniônico. Embora estudos adicionais sejam necessários, os resultados encontrados no presente estudo demonstraram que as membranas de CN e CA possam ser úteis em ceratoplastias. Estas membranas consistem em mais uma opção de enxerto...